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如何判斷大鼠白介素13單克隆抗體是否聚集
點擊次數(shù)：279 更新時間：2026-04-09
? 通過SDS-PAGE和動態(tài)光散射（DLS）可有效判斷大鼠白介素13單克隆抗體是否發(fā)生聚集，兩種方法分別從分子量偏移和粒徑分布角度提供證據(jù)?。
一、SDS-PAGE 法檢測聚集（還原與非還原條件對比）
SDS-PAGE 可通過觀察條帶位置和數(shù)量變化判斷是否存在共價聚集，尤其適用于檢測由二硫鍵介導的穩(wěn)定聚集體。
操作要點：
?樣品處理?：將抗體樣品分為兩組，一組加入β-巰基乙醇或DTT（還原條件），另一組不加（非還原條件）。
?電泳條件?：使用4–12% Bis-Tris凝膠，150 V恒壓電泳至染料前沿到達底部。
?上樣量?：建議每孔加載 ?2–5 µg 抗體?，確保信號清晰可辨。
動態(tài)光散射（DLS）法檢測聚集（溶液狀態(tài)實時分析）
DLS 是一種無需標記、快速評估蛋白質(zhì)粒徑分布的技術，特別適合檢測溶液中微量聚集物。
操作要點：
?樣品準備?：取 ?10–20 µL 抗體溶液?（濃度0.5–1 mg/mL），用PBS緩沖液稀釋，避免氣泡。
?測量角度?：推薦使用 ?90°或反向散射角? 進行檢測，以提高對小粒子的靈敏度 。
?溫度控制?：設定為 ?25°C?，平衡5分鐘后開始測量。